· PolyacrylamideGel kudu dening acrylamide monomer, bahan wiwitan, katalis, lan hak campuran uyah lan buffer bebarengan.
· AcrylamideLan BIS (N, N '- Metilia Double Acrylamide) yaiku Matriks Gel Monomer.
· Ammonium ngabdi maneh proses polimerisasi adesif. Formulasi lem mbutuhake 10% kenceng larutan amonium sing disiapake ing banyu. Umume informasi sing nuduhake kabutuhan kanggo nggunakake aktif. Nanging, solusi 10% bisa diselehake ing 4 ℃ pirang-pirang minggu tanpa ilang kegiatan sing signifikan. Gawe nganti 10 ml lan copot nalika lem gagal ngumpul.
TIP: Persentase sakaAcrylamideIng lem lan lem protein ora padha. Yen nggunakake Acrylamali: BIS, priksa manawa entuk botol sing pas.
· Temed (n, n, n ', n' - tetramethyl Ethylediamine) yaiku katalis, ing botol coklat, diselehake ing kulkas. Tambah sadurunge bubur lem.
· Elektrofesan poliacrylamide digunakake ing elektroforesis kudu dibasuh sadurunge lan sawise saben wektu. Sawise electrophoresis, cuci nganggo sikat lan kain sing alus ing banyu soapy panas, cuci nganggo banyu sulingan lan garing nganti garing.
· Kelembapan lan bledug bisa nyebabake polimer berhi. Sadurunge electrophoresis, ngresiki piring gelas kanthi cleaner kaca lan lebokake nganggo sikat sing alus. Cuci nganggo banyu sulingan lan garing kanthi garing nganggo kertas. Mbilas kanthi etanol igarol 70% sadurunge ngusapi kertas mbantu ngresiki lan nyepetake pangatusan. Tambahake conto saka akrilikida kanthi sukses: bis, banyu, solusi buffer, amonium ngati-ati, temed. Goncang kanthi becik lan tuang langsung.
Sampeyan ora perlu kanggo degass polyacrylamide sadurunge polimerisasi. (Acrylamide biyen dilebokake ing vakum kanggo mbusak umpluk amarga oksigen nyegah polimerisasi.)
Tips sampel lem lembu horisontal.
· Sijine potongan kertas ireng ing kothak ngisor, latar mburi ireng kanggo nggawe bolongan sampel kanggo ndeleng kanthi luwih cetha.
· Lem tank sing diisi buffer, liwat kolam.
· Yen Edge duwe lampu, mateni lampu, ayo cahya sumunar colloid. Tarik conto menyang pipette.
· Nggunakake piranti pipetting otomatis.
· Ing 10-200 MU 1 Cairan obah bisa digunakake ing sebagian besar poin ing sampel. Kanggo bolongan sampel cilik banget (kurang saka 10μ1), sirah pipette sing dawa digunakake kanggo lem urutan luwih trep.
· Pipetting mung nyemplungake ing sampel, nyedhot alon-alon obah cairan. Sampel kasebut bisa uga katon lengket nganggo gliserin, lan pompa cepet bisa nggambar gelembung udara menyang sirah pipette.
· Sampel Sawise nyedhot sirah pipa, bakal mindhah sirah cairan alon-alon ing pinggir pipa utawa ngusir kertas nyusoni kertas ing njaba tetesan. Ati-ati supaya ora nyedhot sampel.
Selehake conto menyang bolongan sampel
· Piranti pipetting supaya tekanan sethithik, nggawe conto rada alon-alon mindhah sirah cair.
· Sirah pipetis dilebokake menyang buffer, rada luwih dhuwur tinimbang bolongan titik, njaga tekanan positif. Tip pipette bisa dilebokake menyang bolongan cilik.
· Alon-alon lan stabil conto. Tip pipette diselehake ing ndhuwur bolongan sampel point, lan conto bakal nglelebke bolongan kasebut. Ayo conto sink kanggo ngisi bolongan sampel tinimbang meksa mlebu.
· Sawise tetes conto pungkasan kanthi sirah cairan, Cairan bakal pindhah menyang sikil kaloro, alon-alon ngunggahake pamindhahan cair, pindhah metu saka buffer
Kepiye carane nggawe sampling lem vertikal?
· Sample lem Lowl Point dibentuk antarane rong potongan kaca. Ing lem tipis, sirah pipette ora bisa dilebokake ing antarane rong piring kaca. Watch Glycerin! Sijine kepala pipette liwat bolongan sampel lan conto bakal nglelebke bolongan kasebut.
· Titik Sampel, priksa manawa kanggo nyelehake titik vertikal saka bolongan sampel polropilena acyl tlapak biru dibilas resik. Cuci acrylamali sing ora dibayar lan banyu sing bisa ditampilake ing sisih ngisor bolongan sampel. Banyu bisa nggawe bolongan sampel luwih cilik. Gunakake syringe 25mL utawa 50mL lan jarum 18 gauge. Tuangake ing buffer elektroforesis lan siram bolongan sampel kanthi ati-ati.
· Bisa angel kanggo ndeleng bolongan sampel, nanging ing padha, liyane gampang. Yen ana bolongan sing berlebihan, conto buffer bisa diuji nganggo bromophenol biru.
Wektu kirim: Mar-31-2023